尊龙凯时推出的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)旨在为研究和临床提供可靠的检测工具,助力猪蓝耳病病毒的诊断与疗效评估。本试剂盒的包装规格为50T/盒,能够有效识别和定性检测猪蓝耳病病毒,具有重要的应用价值。
产品原理
本试剂盒通过实时荧光PCR原理,针对猪蓝耳病病毒的保守区域设计特异性引物和探针。在存在病毒基因组模板的反应体系中,PCR反应能够释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪,实时监测PCR过程中荧光信号的变化,从而实现定性分析。
试剂盒组成
试剂盒包含以下成分:
- PRRSV RT-PCR反应液:875 μL × 1管
- PRRSV混合酶液:125 μL × 1管
- PRRSV阳性对照:40 μL × 1管
- PRRSV阴性对照:40 μL × 1管
- 说明书:1份
其中,阴性对照使用灭菌纯水,而阳性对照则为含有猪蓝耳靶基因的质粒。
储存条件及有效期
该试剂盒应避光保存在-20℃以下,避免反复冻融,有效期为12个月。
适用仪器
适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列及杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
样本要求
为保证检测结果的准确性,样本需符合以下要求:
- 血液或血清样品应使用无菌注射液抽取,并放入离心管中待检。
- 肺脏、淋巴结和脾脏样品需取样20g,添加少量灭菌PBS研磨后稀释,再经4℃下8000rpm离心,取上清待检。
- 必须避免标本间交叉污染。
- 样本应及时检测;若不可立即检测,应在2~8℃条件下冷藏或在-80℃以下长期保存。
检验方法
1. **试剂准备**:从冰箱取出试剂盒,充分融化混匀后瞬时离心。根据反应体系计算所需试剂量。
2. **样本准备**:使用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取样本RNA,依照说明书操作。
3. **加样**:在PCR反应管中添加5μL处理好的待测标本RNA,最终体积为25μL,并盖好PCR反应盖后低速离心。
4. **PCR扩增**:将PCR反应管放入实时荧光定量PCR仪,并根据要求设置扩增参数。
检验结果的解释
阳性检测结果所需的Ct值应≤35,阴性检测结果则应>38或无Ct值。可疑结果在35~38之间需重复检测。
注意事项
使用尊龙凯时试剂盒时,请遵循以下注意事项以确保结果的准确性:
- 实验室需遵循基因扩增实验室管理规范。
- 样本处理应在0-4℃完成,所用器具需无核酶处理。
- 避免样本交叉污染,检测结束后及时清洁工作台。
在现代生物医疗领域,尊龙凯时的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒提供了尖端的解决方案,帮助科研与兽医界更好地应对猪蓝耳病。