尊龙凯时的BBcellProbe®细胞膜染色试剂DiI(BB-441916)是一种橙色荧光标记的细胞膜探针,具有549nm的激发波长和565nm的发射波长。这款细胞膜染色试剂能够通过与膜结构中的脂质分子结合,有效标记细胞,适用于细胞运动监测和细胞定位分析。
该染料具备优良的稳定性,发出强而持久的橙红色荧光(Ex/Em=549/565nm),与绿色荧光染料和蛋白质具有良好的荧光分辨性,非常适合于多重指标的同时染色使用。
尊龙凯时的DiI在进入细胞膜后,会在整个细胞膜扩散。当达到最佳浓度时,能够实现全细胞膜的染色。在未与细胞膜结合前,DiI的荧光强度较弱,但结合后光强显著增强,并能够发出橙色荧光,具备高淬灭常数和激发态寿命。
由于荧光探针DiI对细胞活力影响不显著,因此被广泛用作活细胞和固定细胞的示踪剂,适用于神经等组织的长期示踪。它不仅能实现基本的细胞膜标记,还可监测细胞的融合、粘附,研究发育或移植过程中的细胞迁移,以及通过荧光恢复技术(FRAP)研究脂质在细胞膜中的扩散。
在工作浓度范围内,该染料对细胞无毒性,不会影响细胞的活力和增殖能力。使用时可通过激光共聚焦、荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。
样本类型包括悬浮细胞和贴壁细胞。配制染色工作液时,需要将DiI探针根据样本数量用HBSS或相应的无血清培养基进行500-2500倍稀释。
对于悬浮细胞,先使用PBS洗涤细胞两次,然后加入染色工作液进行重悬。在37℃下孵育细胞,起始孵育时间可设定为20分钟,根据实际情况优化以确保标记均一。孵育结束后,离心并倾倒上清液,再加入预热的培养基重悬细胞。此过程建议重复两次以上。
而对于贴壁细胞,操作步骤相似,开始时也要PBS洗涤两次。接着在细胞培养板或爬片上加入染色工作液,37℃下孵育,吸干染色液后用培养液洗涤,确保培养基覆盖所有细胞,最后采用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,检查激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。
尊龙凯时的DiI探针为细胞研究提供了强大的技术支持,希望能为您的实验工作带来更高效的表现。