2019年11月,加利福尼亚大学旧金山分校的研究团队在《Nature Medicine》杂志上发表了一项关于肠道病毒感染与儿童急性无力脊髓炎(AFM)之间关联的研究。研究采用PhIP-seq技术和病毒组抗原库,对42名AFM儿童的脑脊液样本与58名其他神经系统疾病儿童的对照样本进行了检测,筛选出与AFM病因学相关的病毒特异性抗体。结果显示,肠道病毒抗体在AFM患者中显著富集,ELISA验证结果亦支持这一发现。本研究表明,肠道病毒感染可能是大多数AFM病例的病因,为快速开发肠道病毒脑脊液抗体检测方法提供了指导,对未来进行肠道病毒相关AFM的临床诊断具有重要意义。
AFM(急性无力脊髓炎)首次于2012年在美国被确认,随后超过500名儿童受到影响。在每两年的疫情爆发期中,AFM及肠道病毒EV-D68和EV-A71型常常同时出现。然而,AFM的病因仍然难以明确,研究表明仅在少于50%的病例中能检测到肠道病毒,且只有约2%的AFM儿童脑脊液样本中可找到肠道病毒核酸。因此,研究者担心AFM可能由尚未识别的病原体或免疫反应引起。
为了进一步探讨AFM的发病机制,研究者运用PhIP-seq技术分析了AFM患者及对照组儿童脑脊液中的病毒抗体谱。该技术可高通量检测数百种病毒特异性抗体,最后通过ELISA进行结果验证。
主要研究结果包括:
结果一: PhIP-seq技术全面分析了AFM组儿童中的病毒抗体反应,发现小RNA病毒(尤其是肠病毒)的抗体在AFM患者中显著高于对照组。
结果二: 数据分析揭示出具有免疫原性的抗原肽来自肠道病毒基因组的蛋白质,并确定了新发现的线性结合表位。
结果三: 利用EV病毒VP1蛋白进行ELISA验证,AFM组的脑脊液样本中大多数(22/26)能检测到EV信号,与PhIP-seq结果高度一致。
研究结论支持PhIP-seq技术作为一种高通量抗体谱检测工具,其结合了多肽库、免疫沉淀和高通量测序技术,可对数十万种抗原进行抗体检测,为免疫相关研究提供了强有力的支持。
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