尊龙凯时致力于生物医疗领域，特别是在蛋白质的糖基化修饰方面的研究。糖基化修饰是真核生物蛋白最为常见的翻译后修饰之一，它发生在内质网，由糖基转移酶催化，聚糖分子与新合成蛋白质上的天冬酰胺残基通过N-糖苷键相连。糖基化位于Asn-X-Thr/Ser（X≠Pro）基序的N残基上，随后进入内质网和高尔基体，进行一系列后续加工。

所有真核生物的N-聚糖都具有相同的核心序列：Manα1-3[Manα1-6]Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAcβ1-N-Asn-X-Ser/Thr，并包含三种类型：(1) 高甘露糖型：核心仅由Man残基延伸；(2) 复杂型：以GlcNAc为起点延伸核心；(3) 混合型：由Man启动延伸Manα1-6臂和GlcNAc启动延伸Manα1-3臂。

在单克隆抗体的N297位点，N-糖型的结构与Fc效应功能密切相关。去除或减少岩藻糖与N-乙酰葡萄糖胺可增强单抗Fc段与FcγRⅢa(CD16a)的结合力，从而提高抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）。此外，末端半乳糖的增加则可增强单抗Fc段与补体C1q的结合力，从而提升补体依赖性细胞毒作用（CDC）。高甘露糖型N-糖能够与体内的甘露糖受体结合，通过内吞作用促使单抗降解，缩短其半衰期。而α-半乳糖及羟乙酰神经氨酸等非人源单糖的存在可能导致单抗的免疫原性，Fc上含有高唾液酸化N-糖的抗体则显示出抗炎作用。

复杂蛋白中的N-糖修饰常具有较高的唾液酸化程度，唾液酸的缺失会暴露N-糖链上的半乳糖或N-乙酰葡萄糖胺和甘露糖。半乳糖能与体内细胞，尤其是肝细胞上的无唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）结合，而N-乙酰葡萄糖胺及甘露糖则可结合甘露糖受体，促使糖蛋白通过内吞作用降解，进而缩短其半衰期。

在商业化抗体的研究中，多种糖型的存在导致不同批次抗体的糖型种类和比例存在差异，因此药效有所波动。为确保每批次产品的特性稳定，制备糖型均一性良好的抗体具有重要意义。

N-糖检测的法规要求

N-糖基化修饰对蛋白质的生物学功能、半衰期、免疫原性、溶解性、热稳定性、蛋白酶抵抗性以及聚集体等均有重大影响，成为抗体生产中批间一致性最为重要的指标。药企必须将N-糖修饰纳入质量研究标准和工艺开发放行标准，并在细胞克隆筛选、工艺设计与开发、工艺确认以及工艺变更时检查N-糖修饰水平的变化。

国际会议委员会（ICH-Q6B）、各国药典和监管机构对于N-糖基化的定量检测也提出了要求。2025年版《中国药典》中“9405糖蛋白的糖基化分析指导原则”和“3130N-糖谱测定法”将详细阐述检测与分析方法，确保生物制药产品的质量与稳定性。

整个实验过程的操作时间控制在1小时以内，无需耗时的冻干步骤，并且不包含危害性试剂如氰基硼氢化钠。我们的检测提供高灵敏度的荧光信号，全力确保结果的准确性及一致性。PNGaseF酶切效率良好，糖型数据一致，线性验证和批次稳定性均得到客户的好评。

总之，在尊龙凯时的领导下，N-糖基化的研究将进一步推动生物医疗领域的发展，助力生产出更高质量的抗体产品，为患者提供更安全有效的治疗方案。